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VPAC2 β-Arrestin CHO

CBP71576

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I. Background
      PACAP/VIP 受體家族屬于 B 類(lèi) G 蛋白偶聯(lián)受體(GPCR),包含 PAC1R (PAC1)、 VPAC1R (VPAC1) 和 VPAC2R (VPAC2) 三個(gè)亞型,共同響應神經(jīng)肽 PACAP(垂體腺苷酸 環(huán)化酶激活肽)和 VIP(血管活性腸肽)的調控,通過(guò)激活 Gs/cAMP-PKA 核心信號軸 (部分亞型偶聯(lián) Gq/PLC)廣泛協(xié)調神經(jīng)內分泌、代謝穩態(tài)與免疫調節。

      VPAC2 受體(血管活性腸肽受體 2 型)作為 B 類(lèi) GPCR 的核心亞型,主要富集于下丘 腦視交叉上核(SCN)、胰腺β細胞、脂肪組織及骨細胞,以同等高親和力結合 VIP 和 PACAP,通過(guò) Gs/cAMP-PKA 通路調控代謝穩態(tài)與晝夜節律。VPAC2 的激活可同步 SCN 生物鐘基因(如 Per2)振蕩以維持睡眠-覺(jué)醒周期、促進(jìn)胰島素/胰高血糖素脈沖式分泌調 控血糖平衡、抑制破骨細胞分化并增強骨形成。
 
II. Description
      VPAC2 β-Arrestin CHO 報告基因藥靶模型很好的模擬了體內 VPAC2/β-Arrestin 的信號轉導過(guò)程,原理見(jiàn)下圖所示。當缺乏配體刺激時(shí),β-Arrestin 不與 VPAC2 結合,融合β- Arrestin 的熒光素酶處于失活構象,當 VPAC2 遭遇配體刺激時(shí),融合熒光素酶報告基因的 β-Arrestin 被招募,使熒光素酶報告基因處于激活狀態(tài),加入其底物后發(fā)光信號增強。



Figure 1. 
VPAC2 β-Arrestin CHO 細胞模型原理圖
 
III. Introduction
Host Cell:

CHO

Stability: 20 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: F12K+10%FBS +5 μg/ml Puromycin +5 μg/ml Blasticidin
Mycoplasma Status: Negative
Storage: Liquid nitrogen immediately upon delivery
Application(s):

Functional assay for VPAC2 Receptor

Assay Format: β-Arrestin 
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Hamster
Tissue: Ovary
Morphology: Epithelial
Growth Properties: Adherent
 
V. Representative Data


Figure 2. Recombinant VPAC2 β-Arrestin CHO stably expressing VPAC2.


Figure 3. Dose Response of Agonists in VPAC2 β-Arrestin CHO( C7).


Figure 4. Inhibition of PACAP 1-38 induced β-Arrestin Recruitment by PACAP38 neutralization Ab in VPAC2 β-Arrestin CHO(C7).

 

 

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